> Nieuws > Nieuws uit de sector

Waarom lyseert celcultuur eerst rode bloedcellen?

2022-12-23

Basis introductie
Erytrocytenlysaat is een van de meest eenvoudige en gemakkelijke methoden om rode bloedcellen te verwijderen, dat wil zeggen om rode bloedcellen te splitsen met lysaat, dat geen cellen met een kern beschadigt en rode bloedcellen volledig kan verwijderen. Lysaatsplitsing is een milde methode voor het verwijderen van rode bloedcellen, die voornamelijk wordt gebruikt voor de scheiding en zuivering van weefselcellen die zijn gedispergeerd door enzymdigestie, de scheiding en zuivering van lymfocyten en de verwijdering van rode bloedcellen in de experimenten met weefseleiwit en nucleïnezuur. zure extractie. De weefselcellen die worden verkregen door het lysaat van rode bloedcellen bevatten geen rode bloedcellen en kunnen verder worden gebruikt voor primaire kweek, celfusie, flowcytometrie, scheiding en extractie van nucleïnezuur en eiwit, enz.

Gebruiksaanwijzing
Monster van weefselcellen
1. Verse weefsels werden gedigereerd door pancreas/enzym of collagenase en gedispergeerd in een enkele celsuspensie, en het supernatant werd weggegooid door middel van centrifugatie.

2. Neem ELS-lysaat uit de koelkast bij 4â, voeg ELS-lysaat toe aan celprecipitaat in een verhouding van 1:3-5 (voeg 3-5 ml lysaat toe aan 1 ml verdichte cel), blaas zachtjes en meng.

3. Centrifugeer bij 800-1000 tpm gedurende 5-8 minuten en gooi de bovenste rode heldere vloeistof weg.

4. Het geprecipiteerde deel werd verzameld en 2-3 keer gecentrifugeerd met Hank's oplossing of serumvrije kweekoplossing.

5, als het kraken niet volledig/compleet is, kunnen stappen 2 en 3 worden herhaald.

6. Resuspensiecellen voor latere experimenten; Als RNA wordt geëxtraheerd, kunt u dit het beste doen in de oplossing die is bereid uit stap 4 met behulp van DEPC-water

Rode bloedcellen hebben een zeer korte levenscyclus, slechts 120 dagen, maar ze reproduceren heel snel bloed, en in dit geval zijn ze bijzonder goed in staat tot celdeling, en het zijn de snelst delende cellen van allemaal, dus deze cel is erg waardevol, dus het is erg handig voor celkweek. Het is heel eenvoudig, er zitten geen organellen in, alleen celmembranen en eiwitten.

Vorig:Wat zijn de functies van de ELISA-kit?

Volgende:Reagensvereisten en basisweergave van oplossingsconcentratie.